小鼠ES細(xì)胞(小鼠胚胎細(xì)胞)介紹

　　小鼠ES細(xì)胞(小鼠胚胎細(xì)胞)的分離方法基本成熟，且已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的各個領(lǐng)域。1981年Evans**分離得到小鼠ES細(xì)胞，他以手術(shù)切除受精后2.5 d小鼠卵巢并結(jié)合注射干擾環(huán)境，從而使胚胎延遲著床，再回收胚胎，將其體外培養(yǎng)于STO細(xì)胞飼養(yǎng)層上，結(jié)果得到了小鼠ES細(xì)胞系。Martin G R以外科法剝離小鼠囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞，得到內(nèi)細(xì)胞團(ICM)并將其置于STO細(xì)胞飼養(yǎng)層上，培養(yǎng)基為小鼠PSA-1 ES細(xì)胞條件培養(yǎng)基，結(jié)果也得到小鼠ES細(xì)胞。此后，Axelord等用微滴法得到小鼠ES細(xì)胞系；Kaufman等用單倍體延遲著床小鼠囊胚建立同源二倍體ES細(xì)胞系；Wobus等**用原代小鼠成纖維細(xì)胞作飼養(yǎng)層建立了小鼠ES細(xì)胞系；Smith等**使用大鼠肝細(xì)胞條件培養(yǎng)基作為分化抑制物建立了小鼠ES細(xì)胞系。Brook F A等進(jìn)一步完善了小鼠ES細(xì)胞的分離方法，以致從許多品系小鼠包括近交系和突變系，都可獲得ES細(xì)胞。分離小鼠ES細(xì)胞并非只能從囊胚，也并非必須依賴飼養(yǎng)層細(xì)胞。Dhhaise等將52枚8-細(xì)胞小鼠胚胎消化成單個分裂球并培養(yǎng)于小鼠原代成纖維細(xì)胞(小鼠胚胎細(xì)胞)飼養(yǎng)層上，所用培養(yǎng)基為DMEM/F12，并添加100 mL/L的胎牛血清、100 mL/L的新生犢牛血清和0.1 mmol/L的2-巰基乙醇，5天后，出現(xiàn)多個干細(xì)胞集落，消化傳代后建立了一個ES細(xì)胞系MSB1。將MSB1注入SCID(severe combined immunodeficient mice)小鼠，能產(chǎn)生包含三胚層分化物的畸胎瘤，注入52枚囊胚產(chǎn)生了2個活的個體(1雄，1雌)，但雄性個體無生殖能力。Tojo等用同樣方法從雜交小鼠(C57BL/6×DBA/2)8-細(xì)胞胚也得到了ES細(xì)胞。小鼠ES細(xì)胞具有無限增殖的自我更新能力。Suda Y等將小鼠ES細(xì)胞傳250代以上沒有出現(xiàn)轉(zhuǎn)化的跡象，它們?nèi)跃哂姓５亩扼w核型；在生殖系嵌合體中能產(chǎn)生正常的配子；作為核供體能重組克隆胚胎。上述結(jié)果表明小鼠ES細(xì)胞是永生的。

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